Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒红色荧光

货号	11302	存储条件	f/l
规格	200 Tests
Ex (nm)	570	Em (nm)	583
分子量		溶剂
产品详细介绍

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简要概述

Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的谷氨酸检测的试剂盒，谷氨酸氧化酶属于氧化还原酶的一类，特别能对带有CH-NH2基团供氧受体起反应。它是一种能特异催化水中或者氧气中的L-谷氨酸的酶，可以通过氧化脱氨形成酮戊二酸，氨和过氧化氢。Amplite谷氨酸氧化酶荧光检测试剂盒提供了一种快速超敏感的方法，来检测溶解状态下或者细胞裂解液中的谷氨酸氧化酶。在分析中，L-谷氨酸可以通过谷氨酸氧化酶被氧化成酮戊二酸、氨或者过氧化氢。L-丙氨酸和L-谷氨酸-丙酮酸也参与了这个转氨酶反应，导致多次循环反应，因此显著的增加双氧水的产出。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪（540／590nm）检测，或者使用酶标仪（576nm）检测。Amplite荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到40U/ml的谷氨酸氧化酶。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析，并且无需任何分步骤，就可以轻易地实现自动化。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒。

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.谷氨酸氧化酶标准品或测试样品（50μL）
2.添加谷氨酸氧化酶工作液（50μL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 540 / 590nm处读取荧光强度

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（250X）：
将40μLDMSO（组分F）加入到Amplite Red（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）存在下，Amplite Red不稳定。反应中DTT的浓度应不高于10μM。 Amplite Red在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH7-8下进行。推荐使用所提供的测定缓冲液，pH7.4。

1.2 HRP库存解决方案（400X）：
将200μL测定缓冲液（组分B）加入到辣根过氧化物酶（组分C）的小瓶中。

1.3 谷氨酸储备溶液（400X）：
将1.0mL ddH 2 O加入到谷氨酸小瓶（组分D）中以制备400X谷氨酸储备溶液。

1.4 谷氨酸氧化酶（GO）标准溶液（150 mU / mL）：
将100μL测定缓冲液（组分B）加入到谷氨酸氧化酶标准品（冻干，组分E）的小瓶中以制备150mU / mL谷氨酸氧化酶（GO）标准溶液。

2.标准溶液

谷氨酸氧化酶标准
将30μL150mU/ mL GO标准溶液加入420μL测定缓冲液（组分B）中，得到10mU / mL GO标准溶液（GO7）。取10 mU / mL GO标准溶液进行1：3连续稀释，得到剩余的连续稀释的GO标准品（GO6-GO1）。

3.工作溶液

将20μLDelterite Red储备液（250X），12.5μLHRP储备溶液（400X）和12.5μL谷氨酸储备溶液（400X）加入5 mL分析缓冲液（组分B）中，使总体积为5.07 mL谷氨酸氧化酶工作溶液（GO工作溶液），避光。

样品分析

表1.固体黑色96孔微孔板中GO标准品和测试样品的布局。 GO =谷氨酸氧化酶标准品（GO1-GO7,0.01至10mU / mL），BL =空白对照，TS =测试样品。