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AAT Bioquest Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 深红色荧光,适合微孔板检测 货号22793

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西安百萤生物科技有限公司

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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 深红色荧光,适合微孔板检测


产品介绍

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒是一套用于监测细胞活力的专业工具。细胞活力可通过多种参数进行评估,本试剂盒通过检测磷脂酰丝氨酸(PS)外翻现象特异性监测细胞凋亡过程。在凋亡发生时,PS会从细胞膜内侧转移至外侧,其细胞表面暴露可作为凋亡早期/中期的普适性标志物,且该检测信号早于细胞形态学变化出现。

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒采用小分子荧光探针Apopxin™ PS探针,其与PS的结合亲和力(Kd < 10 nM)显著高于膜联蛋白V。该探针与膜PS结合后呈现深红色荧光,兼具微孔板和流式细胞仪多平台兼容优势(常规凋亡检测试剂通常仅适用于单一平台)

样品实验方案

摘要

1.制备含测试化合物的细胞样本(96孔板:100 µL/孔;384孔板:25 µL/孔)

2.加入等体积的Apopxin™Deep Red工作溶液

3.在室温下孵育1小时

4.使用荧光酶标仪(底部读数模式,Ex/Em = 650/680 nm,截止波长665 nm)检测荧光强度

 

工作液配制

取10 μL 100X Apopxin™Deep  Red(组分A)加入1 mL检测缓冲液(组分B),混匀配制成工作液

注:每孔需100 μL工作液,现配现用

 

实验操作流程

1.96孔板每孔加入10 µL 或者384孔板每孔加入2.5 µL 10x测试化合物母液(溶于PBS或指定缓冲液),空白对照孔(无细胞培养基)加入等量缓冲液

2.将细胞板置于5% CO₂、37℃培养箱孵育(如:Jurkat细胞用星形孢菌素处理4-6小时)

*注:喜树碱等化合物在405 nm激发时可能因380-490 nm宽发射光谱导致假阳性*

3.在每个孔中添加100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的Apopxin™Deep Red工作溶液。

4.室温避光下孵育细胞板≥1小时。

5.(特别针对悬浮细胞)800 rpm离心2分钟(关闭刹车功能)

6.使用荧光酶标仪(底部读数模式,Ex/Em = 650/680 nm,截止波长665 nm)检测荧光强度

注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床及其他非科研用途! 


图示

图1.用Cell Meter™磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒染色的Costar黑壁/透明底部96孔板中Jurkat细胞的荧光图像。 不使用(左)或用20μM喜树碱(右)处理Jurkat细胞5小时。 

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