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巧用三维离心冷冻研磨仪|攻克冻干植物 RNA 提取难题

2025-03-20 09:32:46
一般研磨树叶树枝通常是用来提取DNA、RNA或是蛋白质,叶绿素等色素。叶绿素的提取用于研究植物的光合作用效率或健康状态。也有化学成分检测,例如生物碱,有机酸,挥发性油等。在充分了解客户的实验具体需求后,综合考量实验的精确性,本次实验决定选用三维离心冷冻研磨仪来完成相关操作。
实验目的:对树叶树枝进行研磨提取植物RNA用于后续转录组测序实验。
工作原理:样品通三维高速振荡研磨样品。
实验设备:净信三维离心冷冻研磨仪主机,研磨管、适配器。
冷冻研磨仪
实验过程:
样品研磨实验步骤:
1.树叶剪成1-2mm的小块,放入研磨管中。加入适量TRIzol试剂
2.提前15分钟打开设,启动仪器和制冷开关。确保样品在低温中进行。
3.设置参数18m/S,时间60S,间隔时间20S,研磨2次
4.研磨完成取出研磨管,室温静置3分钟。
RNA提取操作:
1.每TRIzol试剂加入0.2 mL氯仿,迅速盖紧管盖,用手剧烈振荡。室温静置2-3分钟,使混合物分层。
2.将研磨管放入离心机,设置离心参数4,000 × g,离心15分钟(4°C条件下)。
3.离心后,混合物分为三层:上层:无色水相(含RNA)。中间层:白色蛋白相。下层:红色有机相(含DNA和蛋白质)
RNA沉淀:
1、小心吸取上层水相,转移至新的1.5 mL离心管中。
2、加入等体积yi丙醇,轻轻颠倒混匀。室温静置10分钟,使RNA沉淀。
3、4°C条件下,12,000 × g离心10分钟,弃上清。
实验结果:
树枝树叶研磨前后效果对比图
本次实验采用三维离心冷冻研磨仪处理冻干后的树枝树叶效果非常好,可以批量,均一处理样品,样品处理好可以直接进入下一步骤,方便快捷。
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