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今天百萤给大家带了的是经典荧光染料中香豆素的介绍及推荐。哪种香豆素产品使用范围最广?与其他经典荧光染料相比,香豆素有什么优势?希望通过百萤此次的推荐,可以让大家对香豆素有一个新的了解。
香豆素及其衍生物
香豆素和香豆素衍生物是紫外线可激发的蓝色荧光染料,其短发射波长在390至480 nm范围内。用途最广泛的香豆素包括AMCA、7-氨基香豆素(AFC和AMC)、7-羟基香豆素和7-甲氧基香豆素的衍生物, 它们用于制备蓝色荧光肽、蛋白质和其他生物分子。与荧光素, 罗丹明和花青相比,香豆素由于其相对较低的消光系数而产生中等亮度的荧光,光稳定性比较稳定。蓝光探针最适合用于细胞靶标等高丰度靶标的直接成像、细胞追踪应用、检测酶活性的底物以及某些多色荧光应用-包括免疫荧光、核酸和蛋白质微阵列、原位杂交和神经元追踪等。
光谱性质
| 激发光线: 405 nm滤波器组:DAPI最大激发光:376nm最大发射光:480nm消光系数:75,000cm-1 M -1量子产率:0.53 | 图1: AMCA(一种常用的香豆素衍生物)的激发和发射光谱。 |
AMCA和Alexa Fluor 350的最佳替代品iFluor 350
iFluor 350染料是一种与AMCA光谱相似的亮蓝色荧光染料,具有比香豆素更优秀的水溶性、光稳定性以及更高的荧光量子产率。iFluor 350缀合物非常适合直接对高丰度靶标成像,在多色应用(例如流式细胞仪和超分辨率荧光显微镜)中特别适用,而不会影响绿色和红色荧光探针的性能。图2.将 HeLa细胞固定在4%甲醛中,然后用iFluor 350鬼笔环肽染色。
表1.iFluor 350与AMCA光谱比较
| 荧光产品 | 量子产率 | 消光系数 | 亮度 |
| iFluor 350 | 0.95 | 20,000 | ** |
| AMCA | 0.53 | 19,000 | * |
香豆素产品类型
我们提供多种香豆素产品,包括用于标记肽、蛋白质和其他生物分子的活性染料、缀合物、以及用于检测细胞、匀浆和溶液中酶活性的底物。
7-羟基-4-甲基香豆素 (4-甲基伞形酮)
6-氯-8-氟伞形酮 (CF-MU)
7-氨基-4-三氟甲基香豆素(AFC)
7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)
香豆素活性染料
选择一种染料标记化学试剂以修饰以下反应基团:
| 胺 | 硫醇 | 羧基,羰基和点击化学 |
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酶底物
选择一种酶底物,以检测酶促活性:
| 半胱天冬酶 | 蛋白酶 | 肽酶 | 磷酸酶 |
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缀合物
选择一种香豆素缀合物进行凋亡检测、细胞器标记:
| 二级抗体缀合物 | F-肌动蛋白标记 | 凋亡检测 |
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