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产品规格
可售数量: 2Labelings
抗体标记试剂盒 ReadiLink mFluor 420
货号 | 1105 | 存储条件 | f/l |
规格 | 2 Labelings | ||
Ex (nm) | 398 | Em (nm) | 411 |
分子量 | 溶剂 | ||
产品详细介绍 |
产品优势
1.专为流式检测设计的大斯托克斯位移染料
2.即用型配方,标记过程无需纯化
适用范围
主要用于标记抗体
产品介绍
AAT Bioquest公司开发的mFluor™系列染料专为流式细胞检测优化设计,其荧光特性可被流式细胞仪常规激光线(包括405 nm、488 nm及633 nm) 激发。其中mFluor™ Violet 420染料的激发与发射峰分别位于~405 nm和~420 nm,其光谱特性使其成为InvitroGen公司Cascade® Blue染料的理想替代品。mFluor™ Violet 420 SE(琥珀酰亚胺酯)具有良好稳定性,并能与蛋白质氨基基团发生 、特异性的结合反应。
产品说明书
标准操作规程(标记50μg蛋白质)
将所有组分加热并在打开前将样品瓶短暂离心,并在开始结合前立即准备所需的溶液。 以下SOP是标记抗HDAC IgG抗体的实例。
1.准备蛋白质溶液(溶液A):
为了标记50g蛋白质(假设目标蛋白质浓度为1mg / mL),将5L(总反应体积的10%)的反应缓冲液(组分B)与50L目标蛋白质溶液混合。
注1.如果您的蛋白质浓度不同,请相应调整蛋白质体积,使~50μg蛋白质可用于标记反应。
注2:为了标记100g蛋白质(假设目标蛋白质浓度为1mg / mL),将10μL(总反应体积的10%)反应缓冲液(组分B)与100μL目标蛋白质溶液混合。
注3:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中;如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中,必须用1X PBS(pH 7.2-7.4)透析,或使用Amicon Ultra-0.5,Ultracel-10膜,10 kDa(来自Millipore的cat#UFC501008)去除广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(如硫酸铵和乙酸铵)。
注4:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好地标记。
注5:如果蛋白质浓度小于1 mg / mL,则结合效率显着降低。为获得标记效率,建议蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL。
2.运行结合反应:
2.1将蛋白质溶液(溶液A)加入一瓶标记染料(组分A)中,通过反复移液几次将其混合均匀,或将小瓶涡旋几秒钟。
注意:使用标记染料的两个小瓶(组分A)通过将100μg蛋白质分成2x50μg蛋白质并使每个50μg蛋白质与一小瓶标记染料反应来标记100μg蛋白质。 将两个小瓶合并用于下一步。
2.2将缀合反应混合物在室温下保持30-60分钟。
注意:如果需要,可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。
3.停止共轭反应:
3.1添加5 L(对于50μg蛋白质)或10L(对于100μg蛋白质),其为TQ染色猝灭缓冲液(组分C)的总反应体积的10%到缀合反应混合物中(来自步骤2.2),将它们混合 好。
3.2在室温下孵育10分钟。
3.3标记的蛋白质(抗体)现在可以使用了。

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18502920169
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029-68064558

AAT Bioquest ReadiLink Rapid mFluor Violet 420抗体标记试剂盒 货号1105
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