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AAT Bioquest Amplite 荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒 红色荧光 货号11300

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500Tests起订

产品规格

可售数量: 500Tests

西安百萤生物科技有限公司

9年

经营年限

陕西西安

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9.5

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产品属性

Amplite 荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒 红色荧光

货号                               11300                         存储条件                     f/l                             
规格500 Tests

Ex (nm)570Em (nm)583
分子量
溶剂



适用范围

用于葡萄糖氧化酶检测

 

产品介绍

葡萄糖氧化酶是一种二聚体蛋白,能够催化β-D-葡萄糖氧化生成过氧化氢和D-葡萄糖酸-1,5-内酯(后者会自发水解为葡萄糖酸)。该酶在临床上广泛应用于体液葡萄糖检测,同时在食品工业中用于清除饮料、食品及其他农产品中的残留葡萄糖和氧气。此外,葡萄糖氧化酶还是生物传感器检测葡萄糖的核心元件。

Amplite®葡萄糖氧化酶检测试剂盒提供了一种快速、灵敏的溶液葡萄糖氧化酶检测方案。该试剂盒支持96孔或384孔微孔板检测,无需分离步骤即可实现自动化操作。其采用独特的Amplite® Red底物,支持双信号读取模式——既可通过荧光酶标仪检测荧光信号,也可通过吸光酶标仪进行吸光度测定。经测试,使用Amplite®荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒,在100µL反应体系中 低可检测至0.05 mU/mL的葡萄糖氧化酶活性。

注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!




实验步骤

样品实验方案

简要概述

1.准备GO工作溶液(50μL)
2.添加葡萄糖氧化酶标准品或测试样品(50μL)
3.在37°C孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540 / 590nm处的荧光强度


溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色储备液(250X):
将100μLDMSO(组分E)加入到Amplite Red(组分A)的小瓶中。应立即使用原液。注意:在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)存在下,Amplite Red不稳定。反应中DTT的浓度应不高于10μM。 Amplite Red在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH 7-8下进行。推荐提供的测定缓冲液(pH 7.4)。

2. HRP库存解决方案(50X):
将1mL测定缓冲液(组分B)加入到辣根过氧化物酶(组分C)的小瓶中。

3.葡萄糖氧化酶标准溶液(100 U / mL):
将1mL测定缓冲液加入葡萄糖氧化酶小瓶(组分D)中。

4.葡萄糖原液(10X):
将5mL测定缓冲液加入葡萄糖小瓶(组分F)中。


2.标准溶液

葡萄糖氧化酶标准
通过将2μL的100U / mL葡萄糖氧化酶标准溶液稀释到200μL的测定缓冲液(组分B)中来制备葡萄糖氧化酶标准品,以具有1000mU / mL葡萄糖氧化酶标准溶液。 然后取10μL1000mU/ mL葡萄糖氧化酶标准溶液,进行1:100稀释,得到10mU / mL葡萄糖氧化酶标准溶液(GOS7)。然后进行1:3连续稀释以获得剩余的连续稀释的葡萄糖氧化酶标准品(GOS6-GOS1)。包括非葡萄糖氧化酶缓冲液作为空白对照。 葡萄糖氧化酶浓度应低两倍(即0至5mU / mL)。注意:高浓度的葡萄糖氧化酶可能会因Amplite Red(非荧光产物)的过氧化而导致荧光信号降低。


3.工作溶液

将20μLDelterite Red储备液(250X),100μLHRP储备液(50X)和500μL葡萄糖储备液(10X)加入4.3 mL分析缓冲液(组分B)中,使总体积为5 mL葡萄糖氧化酶(GO)工作溶液。 避光。


样品分析

表1.固体黑色96孔微孔板中葡萄糖氧化酶标准品和测试样品的布局。 GOS =葡萄糖氧化酶标准品(GOS1-GOS7,0.01至10mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BLBLTSTS
GOS1GOS1......
GOS2GOS2......
GOS3GOS3

GOS4GOS4

GOS5GOS5

GOS6GOS6

GOS7GOS7

表2.每个孔的试剂组成

容积试剂
GOS1-GOS750ul连续稀释(0.01至10 miU / mL)
BL50ul分析缓冲液(组分B)
TS50ul样品

1.根据表1和表2中提供的布局制备葡萄糖氧化酶标准品(GOS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.在葡萄糖氧化酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLGO工作溶液,使总葡萄糖氧化酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLGO工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.将反应在37°C孵育10至30分钟,避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm,发射= 590-600nm(Ex / Em = 540 / 590nm)监测荧光强度。 注意:也可以将板的内容物转移到白色透明底板上,并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。 然而,与荧光读数相比,吸收检测具有更低的灵敏度。


级别 超纯、高纯
含量 95%
产品规格 500 Tests
品牌 AAT Bioquest
用途范围 AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 顺丰包邮 免费技术咨询

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