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aat bioquest Amplite 酮体检测试剂盒 货号13830

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200Tests起订

产品规格

可售数量: 200Tests

西安百萤生物科技有限公司

10年

经营年限

陕西西安

所在地区

10.0

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产品属性

Amplite 比色法酮体检测试剂盒

货号13830存储条件F/L
规格200 Tests

Ex (nm)575Em (nm)
分子量
溶剂
产品详细介绍



简要概述

        Amplite 比色法酮体检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的的试剂盒, 提供了一种灵敏的荧光检测方法,用于测量生物样品中的β-HB水平。该测定基于β-HB的酶偶联反应,其中产物NADH可以通过荧光NADH传感器特别监测。荧光信号可以通过具有在570nm至610nm的波长处的OD比率的吸光度酶标仪来测量。使用此试剂盒,我们能够在100μL反应体积中检测到低至4μM的β-HB。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 比色法酮体检测试剂盒

适用仪器


光吸收酶标仪
吸收:570/610
推荐孔板:透明底板



产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备β-HB工作溶液(50 µL)
2.添加β-HB标准品或测试样品(50 µL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.OD比为570/610 nm时监测吸光度的增加

 

溶液制备 

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 NAD储备溶液(100X):
将100 µL H2O加入NAD小瓶(组分C)中,制成100X NAD储备溶液。

1.2 β-HB标准溶液(100 mM):
将1 mL H2O或1X PBS缓冲液添加到小瓶β-HB标准溶液(组分D)中,制成100 mMβ-HB标准溶液。

 

2.标准溶液

β-HB标准
向990 µL 1X PBS缓冲液中加入10 µL 100 mMβ-HB标准储备液,以生成1000 µMβ-HB标准溶液(HB7)。 取1000 µMβ-HB标准溶液(HB7),并在PBS中进行1:3系列稀释,以得到系列稀释的β-HB标准溶液(HB6-HB1)。 注意:稀释的β-HB标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

 

3.工作溶液

3.1 将5 mL测定缓冲液(组分B)加入一瓶酶混合物(组分A)中。

3.2 将50 µL 100X NAD储备溶液添加到组分A + B的瓶子中,并充分混合以制成β-HB工作溶液(组分A + B + C)。 注意:此β-HB工作溶液不稳定,请立即使用,并避免直接暴露在光线下。

 

样品操作及实验分析

表1.底部透明的96孔微孔板中β-HB标准品和测试样品的布局。 HB =β-HB标准(HB1-HB7,1至1000 µM); BL =空白对照; TS =测试样品。

BLBLTSTS
HB1HB1......
HB2HB2......
HB3HB3

HB4HB4

HB5HB5

HB6HB6

HB7HB7

表2.每个孔的试剂组成

孔容积试剂
HB1-HB750ul连续稀释(1至1000 µM)
BL50ul1X PBS缓冲液
TS50ul测试样品

1.根据表1和表2提供的布局,准备β-HB标准液(HB),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µLβ-HB工作溶液添加到β-HB标准品,空白对照和测试样品的每个孔中,以使总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板,将25 µLβ-HB工作溶液添加到每个孔中,总体积为50 µL /孔。

3.避光保存,室温下孵育反应10-30分钟。

4.用吸光度板读数器以OD比570/610 nm监测吸光度的增加。



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