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产品规格
可售数量: 10ml
StrandBrite 绿色RNA定量试剂 200X DMSO溶解
简要概述
StrandBrite 绿色RNA定量试剂是美国AAT Bioquest生产的用于定量RNA的试剂,检测和定量少量RNA对于多种分子生物学程序极为重要,例如在进行Northern blot分析,S1核酸酶测定,RNase保护测定,cDNA文库制备,反向操作之前,测量体外转录RNA的产量和测量RNA浓度。转录PCR和差异展示PCR。测量核酸浓度 常用的技术是测定260 nm的吸光度。基于吸收率的方法的主要缺点是蛋白质,游离核苷酸和其他紫外线吸收化合物引起的干扰。使用敏感的荧光核酸染色剂可缓解此干扰问题。StrandBrite RNA定量试剂是一种超灵敏的荧光核酸染料,用于定量溶液中的RNA。StrandBrite RNA定量试剂可通过荧光酶标仪或荧光计检测低至5 ng / mL的RNA。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的StrandBrite 绿色RNA定量试剂。
产品说明书
样品实验方案
溶液配制
工作溶液配制
1.准备StrandBrite 工作溶液:
1.1 准备的水溶液工作溶液StrandBrite 绿色通过在TE浓缩DMSO溶液的200倍稀释液(在DEPC的10mM的Tris-HCl,1mM的EDTA,pH 7.5中经处理的水)。例如,添加50μL StrandBrite 绿色 至10mL TE缓冲液,以制备足够的工作溶液在200至100个测定样品 μ L终体积。通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。
注意1:我们建议在塑料容器中而不是玻璃中制备此溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。
注意2:为获得结果,应在准备后的几个小时内使用此溶液。
标准液配制:
1.准备RNA标准液的系列稀释液(0到1µg / mL ):
1.1准备一个100 μ 克/ mL储备在RNA的溶液DEPC处理过的水。
1.2添加10μL 100 μ 克/毫升RNA储备溶液(来自步骤2.1) ,以490 μ 大号测定缓冲液(成分B)为具有2 微克/ mL的RNA溶液,然后执行1:2系列稀释来获得1000, 500、250、125、62.5、31.3、15.6和0 ng / mL。
1.3如表1和表2所述,将RNA标准品和含RNA 的测试样品添加到96孔黑色固体微孔板中。
表1黑色固体96孔微孔板中RNA标准品和测试样品的布局
BL | BL | TS | TS |
RS1 | RS1 | ... | ... |
RS2 | RS2 | ... | ... |
RS3 | RS3 | ||
RS4 | RS4 | ||
RS5 | RS5 | ||
RS6 | RS6 | ||
RS7 | RS7 |
注:RS = RNA 标准;BL =空白控制;TS =测试样品
表2每个孔的试剂组成
RNA标准 | 空白对照 | 测试样品 |
连续稀释(100ul) | TL:100ul | 100ul |
注:将从15.6到1000 ng / mL的RNA标准品的系列稀释液一式两份地添加到DS1到DS7的孔中。
运行dsDNA 分析:
1.将100μLStrandBrite Green工作溶液(来自步骤2)添加到RNA标准品,空白对照和测试样品(参见步骤3)的每个孔中,以使总RNA测定体积为200μL/孔。
注意:对于384孔板,每孔添加25μL样品和25μLStrandBrite Green工作溶液。
2.在避光的条件下,将反应在室温下孵育5至10分钟。
3.用分光荧光计在Ex / Em = 490/525 nm (在515 nm 处截止)监测荧光的增加。
注意:为使光漂白效应 小化,请对所有样品保持恒定的荧光测量时间。
4.用空白孔(仅含测定缓冲液)中的荧光作为对照,并从具有RNA标准液或测试样品的比色皿中减去。RNA样品的浓度根据RNA标准曲线测定。
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18502920169
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029-68064558
aat bioquest StrandBrite 绿色RNA定量试剂 200X DMSO溶解 货号17610
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