公司介绍     

生物 分析方法开发

分析方法验证

高品质科研elisa试剂盒、化学发光试剂盒开发与定制

供科研使用，不得用于临床检验。

泉州市睿信生物科技有限公司是集研发、生产、销售、服务及品牌代理为一体的生物技术公司，目前可提供各种抗体、免疫学试剂盒、生化试剂、分子生物学试剂等高品质产品及服务，涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。依托湖北武汉、江苏南京、福建泉州三大研发及销售 ，布局全国市场。

我们致力于为高等院校、研究机构、诊断试剂厂家、生物制药公司、动物造模公司等科研单位，提供高质量检测试剂盒、方法学开发及实验外包服务，为客户的科学研究提供可靠的技术支持。公司干技术人员均有10年以上的从业经验，是值得您信赖的科研伙伴！

企业建立了完善的研发系统和生产设备，并与知名高校、研究机构、 企业等建立战略合作关系。公司自成立以来，就非常注重企业信息化的建设，我们采用了先进的内部供应链信息处理平台，保证客户的需求可以准确、 处理。

      为每一位科研人员献上高品质的产品及服务是我们的使命。

样本处理：

1.  血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2.  血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3.  组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

注意事项:

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射，不能使用过期产品。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。

人凝血因子2（F2）elisa试剂盒

 在甘肃和青海两省的21个羊场无菌采集10日龄以内患腹泻症羔羊粪便167份；用轮状病毒-大肠杆菌K99-兰伯氏贾第鞭毛虫-隐孢子虫四联胶体金检测试剂盒检测轮状病毒、兰伯氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫；用16S r DNA扩增技术对细菌病原进行鉴定,分离到的103株疑似致病性大肠埃希菌用110只昆明系小鼠进行致病性试验,并对患病小鼠进行病原学、病理学诊断。结果表明,甘青地区致羔羊腹泻症的主要病原是致病性大肠埃希菌,占61.68%,且致病性存在一定差异。利用PCR技术对致病性大肠埃希菌的8种毒力基因进行检测。结果表明甘青地区引起羔羊腹泻症的致病性大肠埃希菌同时携带多种毒力基因,以携带ipa H、eae、stx1的菌株常见。用k-b药敏纸片法对分离的致病性大肠埃希菌进行15种 的药敏试验,表明青霉素和林可霉素的耐药率超过95%,厄他培南、美罗培南、多粘菌素B和硫酸黏菌素敏感,耐药率不超过10%。用PCR技术检测氨基糖苷类、四环素类和β-内酰胺类 耐药基因,并分析其与耐药表型相关性。四环素类耐药基因tet A和tet B的检出率分别为83.50%和68.93%,tet A基因与四环素耐药表型之间存在高度正相关,tet B与四环素耐药表型存在中度正相关；β-内酰胺类相关耐药基因bla TEM、bla SHV的检出率分别为63.11%和56.31%,且两种耐药基因与氨苄西林的耐药表型之间显著相关；氨基糖苷类耐药基因aac(3)-Ⅰ检出率占78.64,且与卡那霉素耐药表型之间存在高度正相关。研究表明,致病性大肠埃希菌是甘青地区引起羔羊腹泻症的主要病原,其致病性之间存在差异,以携带ipa H、eae、stx1毒力基因的菌株常见；致病性大肠埃希菌对青霉素、林可霉素具有很强的耐药性,且多数菌株携带四环素类 耐药基因tet A和tet B、β-内酰胺类 耐药基因bla TEM和bla SHV以及氨基糖苷类耐药基因aac(3)-Ⅰ,各菌株耐药表型与携带的耐药基因之间存在一定的相关性。

人凝血因子2（F2）elisa试剂盒

目的:探讨高血压患者外周血CD4+T淋巴细胞上的电压门控性钾通道(Kv1.3)电流的变化。方法:收集24例高血压患者和24例健康志愿者外周血,免疫磁珠法分选出CD4+T淋巴细胞,分别给予0、2nmol/L血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)培养48h,采用全细胞膜片钳技术记录淋巴细胞Kv1.3钾通道电流,并用RT-PCR检测Kv1.3钾通道和血管紧张素受体(AT1)蛋白mRNA的表达,ELISA试剂盒检测培养上清IFN-γ浓度。结果:①高血压患者CD4+T细胞Kv1.3钾通道电流峰值(307±117)pA,明显高于正常人(233±95)pA(P0.05)。②给予AngⅡ干预后,正常人CD4+T细胞Kv1.3钾通道电流峰值明显增高(325±99)pA(P0.05);而高血压患者CD4+T细胞Kv1.3钾通道电流峰值增高不明显。正常加药组CD4+T细胞Kv1.3钾通道mRNA表达也增高。③淋巴细胞存在AT1受体,且高血压患者CD4+T细胞AT1受体mRNA表达明显高于正常人;AngⅡ干预后高血压患者CD4+T细胞培养上清IFN-γ浓度较正常人增加更明显。结论:高血压患者淋巴细胞Kv1.3钾通道表达增多,AngⅡ能增加Kv1.3钾通道表达,AngⅡ促进CD4+T细胞活化和IFN-γ分泌的效应可能由AT1受体介导。本研究提示炎症参与高血压的发病及其靶器官损害,而CD4+T细胞Kv1.3钾通道在高血压炎症的发 展中发挥重要作用。目的制备重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,rhbFGF)单 抗体,鉴定其特性,建立双抗体夹心ELISA检测方法。方法以rhbFGF为免疫原,免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合技术建立能稳定分泌抗rhbFGF杂交瘤细胞株,制备抗rhbFGF单 抗体,采用Ig亚类ELISA试剂盒鉴定抗体亚类,间接ELISA法检测抗体效,Western blot鉴定抗体特异性。HRP标记McAb并建立夹心ELISA检测方法。结果获得2株(分别命名2D3、5F7)可分泌特异性McAb的强阳性细胞株,腹水抗体效价在10-5以上,IgG亚类均为IgG1,轻链为K链。Western blot证明2株McAb特异性良好,双抗体夹心ELISA检测rhbFGF 检测限达到2 ng/ml。结论成功制备 价的抗rhbFGF单 抗体,建立抗rhbFGF双抗体夹心ELISA定量检测方法。

人凝血因子2（F2）elisa试剂盒

目的获得重组MPT64蛋白，研究其免疫学特性，评价其在结核病血清学诊断中的价值。方法应用基因工程技术表达、纯化MPT64蛋白，通过Western blotting分析其抗原性。分别以结核分枝杆菌PPD或纯化的rMPT64蛋白为抗原，通过ELISA方法及结核病一步法检测血清中抗结核抗体。结果重组质粒pET 15b-MPT64测序表达除83位密码子由CCA突变为CCG外，其余密码子均与报道的相同，但其氨基酸序列无变化。它在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在，表达量占菌体总蛋白的20～30%，分子量约26kDa，Western blotting分析它与抗结核分枝杆菌多 抗体具有良好的免疫反应性。纯化后的rMPT64样品经SDS-PAGE和光密度扫描分析表明其纯度约为80%左右，每100ml培养菌可获得10mg左右的重组蛋白。以33例正常人血清的OD值+2S为正常界限值，PDD的特异性和敏感性分别为94%(31/33)、63.7%(21/33)、66.7%；rMPT64纯化蛋白分别为 94%(31/33)、30.3(10/33)；一步法分别为88%(29/33)、66.7%(22/23)。结论 pET15b-MPT64大肠杆菌工程菌能以包涵体形式 表达重组MPT64蛋白，该蛋白具有较高的抗原特异性和免疫反应性。rMPT64纯化蛋白有可能成为结核病血清学诊断的组合抗原之一。观察金属硫蛋白（MT）-1B、MT-1X mRNA在燃煤型砷中毒患者外周血细胞中的表达。方法 采集贵州省兴仁县燃煤型砷中毒患者（砷中毒组）及非病区正常人（对照组）外周血，各50例，提取及纯化总RNA，采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）技术测定血细胞中MT-1B、MT-1X mRNA的表达，以β-actin 作为质控。结果 对照组外周血细胞MT-1B、MT-1X mRNA表达为0.15 ± 0.25、44.39 ± 27.67，砷中毒组为 0.03 ± 0.10、7.36 ± 7.34，组间比较差异有统计学意义（t值分别为3.15、9.15，P < 0.05）。结论 砷中毒降低MT-1B、MT-1X在外周血细胞中的表达。