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AAT Bioquest 钙离子荧光探针Mag-Fura-2, AM 货号 20383

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西安百萤生物科技有限公司

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产品属性

钙离子荧光探针Mag-Fura-2, AM

产品介绍

Mag-Fura-2, AM 是一种比率型、可紫外光激发的细胞内镁指示剂。其光谱特性与 Fura-2 非常接近。这种乙酰氧甲酯 (AM) 形式可用于非侵入性细胞内加载。它也可用于测量活细胞中的高钙离子浓度。

 

操作步骤

储备液配制

所有未使用的储备液(除非另有说明)应在配制后分装成单次使用量,并于-20°C保存。避免反复冻融。

Mag-Fura-2 AM储备液

使用优质无水DMSO配制2至5 mM的Mag-Fura-2 AM储备液。

 

实验操作步骤

工作液配制

Mag-Fura-2 AM工作液

实验当天,将Mag-Fura-2 AM溶解于DMSO或解冻储备液至室温。

选用合适缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液),加入0.04% Pluronic® F-127,配制2至20 µM的Mag-Fura-2 AM工作液。对多数细胞系,推荐终浓度为4-5 μM。具体染料负载浓度需通过实验优化。

注意:1.非离子型表面活性剂Pluronic® F-127可增强Mag-Fura-2 AM水溶性,AAT Bioquest提供多种Pluronic® F-127溶液。
          2.若细胞存在有机阴离子转运体,可在工作液中加入1-2 mM丙磺舒(孔板内终浓度0.5-1 mM)以减少去酯化染料的渗漏。AAT Bioquest提供多种ReadiUse™丙磺舒产品(包括水溶型、钠盐及稳定化溶液)。

 

标准实验流程

以下为活细胞加载AM酯的推荐方案,请根据实际需求调整:

1.在生长培养基中培养细胞过夜。

2.次日向细胞板加入1X Mag-Fura-2 AM工作液。

注意:若待测化合物与血清存在干扰,加载染料前需更换为新鲜HHBS缓冲液。

3. 37°C细胞培养箱中孵育30-60分钟。

注意:部分细胞系延长孵育时间(>1小时)可增强信号强度。

4.移除工作液,更换为HHBS或自选缓冲液(如适用,可含1 mM丙磺舒等阴离子转运体抑制剂)。

5.加入刺激剂后,立即使用集成程序化液体处理系统(如FlexStation)的荧光酶标仪在Ex/Em1 = 340/510 nm截止475 nm和Ex/Em2 = 380/510 nm截止475 nm进行荧光测量检测荧光


级别 超纯、高纯
含量 95%
产品规格 10x50 ug
品牌 AAT Bioquest
用途范围 AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 免费技术咨询 顺丰包邮

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