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上海飞测FD-C31DON呕吐毒素免疫亲和柱,操作简便吸附力高

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可售数量: 999支

上海飞测生物科技有限公司

12年

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上海

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10.0

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产品属性

  【测定原理】

  上海飞测呕吐毒素免疫亲和柱产品测定的基础是抗原抗体反应,抗呕吐毒素(DON)的单 抗体连接在柱内凝胶介质上,样品中的DON经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢通过DON免疫亲和柱,在免疫亲和柱内,DON与抗体结合,洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。 后采用 洗脱DON,然后进行相关分析。

  【所需材料】(不提供)

  (1)设备及器皿耗材:天平、粉碎机、离心机、涡旋混匀仪或摇床(转速≥200r/min);量筒、50mL玻璃漏斗、微量移液器(100μL~1000μL)、快速定性滤纸、玻璃微纤维滤纸(whatman934-AH,直径11cm,孔径1.5μm)、20mL玻璃注射器等。

  (2)试剂: (色谱级)、聚乙二醇8000(PEG)、蒸馏水或去离子水。

  【试剂配制】

  0.1%吐温20-PBS溶液:将0.1%吐温20-PBS粉末(厂家提供)直接用900mL水全部溶解后,用HCl或NaOH调pH至7.4, 后用水定容至1L。

  5M NaOH溶液:称取20g NaOH,溶于100mL水中。

  【样品制备】

  ----准确称取25g(精确至0.01g)粉碎的样品,加入5g聚乙二醇8000,并与125mL水混合,摇床振荡提取15min;

  ----用快速定性滤纸过滤或4000r/min,离心5min;对于pH低于6.0的玉米加工副产物及饲料等的滤液或上清液,需要用5M NaOH调pH至7.0左右,并用玻璃微纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用;

  ----准确移取2.5mL混匀滤液(相当于0.5g样品)过亲和柱。

  【亲和柱净化】

  注意:整个纯化过程尽量不要让柱子干燥!

  ----3mL柱管取出上方堵头,减去上堵头螺纹下突出部分,插回柱子上,另一端与20mL针筒固定后使用;将1mL柱管上方堵头取出后斜剪断,然后再插回柱子上(柱管内偶见有小气泡属正常现象,不影响亲和柱的使用);

  ----准确移取上述混匀滤液,注入针筒中,调节针筒压力使其以2秒/滴的速度缓慢通过免疫亲和柱;

  ----用20mL 水冲洗柱子(对于饲料及玉米加工副产品等颜色较深的样液,先用10mL 0.1%吐温20-PBS清洗,再用10 mL 10% -水冲洗柱子, 后用10mL水冲洗柱子。),流速1秒/滴,弃去流出液,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体;

  ----准确加入1.5mL (色谱级)洗脱,流速自然重力,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体。收集全部洗脱液,进行相关测定。

  【检测方法】

  IAC-HPLC法检测

  ----过有机滤膜(孔径0.22μm)后,直接HPLC测定;或在50℃下用氮气缓缓地吹至近干,加入流动相混匀,过有机滤膜(孔径0.22μm)后,参照GB 5009.111-2016或GB/T 30956-2014条件进行HPLC测定。

  【保质期】

  有效期为12个月。

  生产日期见包装盒。


级别 分析纯AR
用途类别 标准品
含量 ≥2000ng
品牌 上海飞测
用途范围 呕吐毒素的样品前处理
产品规格 1
品名 DON呕吐毒素免疫亲和柱

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