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大鼠心肌特异性肌钙蛋白T ELISA试剂盒 cTnT试剂盒 cTnT ELISA

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卡迈舒(上海)生物科技有限公司

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大鼠心肌特异性肌钙蛋白T ELISA试剂盒 cTnT试剂盒 cTnT ELISA
标本的采集及保存 

1.        血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2.        血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3.        其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

4.        样本处理:血清或血浆标本推荐稀释5,000倍。

注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

大鼠心肌特异性肌钙蛋白T ELISA试剂盒 cTnT试剂盒 cTnT ELISA测定步骤:

测定时一般需经过以下步骤:固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。ELISA操作较繁杂,操作不当将引起较大的误差。在操作中应注意以下5个方面。

1.随着病情的进展或由其他因素影响,某些抗体在机体内的含量发生大幅波动,因此有必要对标本进行预处理,例如对血清标本作适当稀释,或离心分离血脂等。间接法测定中,标本适当稀释还可降低非特异性反应。

2.加样一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加样:加标本、加酶结合物、加底物和加终止液。加标本时必须每份标本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶结合物、底物和终止液时则不需更换吸嘴。

3.在成批手工检测中,还应注意操作时差的影响。加样及混匀时间的差异,使抗原抗体反应和酶促反应时间不一致,对竞争法及定量检测影响很大,不注意可能会导致错误结果或定量不准。

4.洗涤是ELISA操作过程中决定实验成败的一个关键步骤。目的是除去未结合的免疫反应物,终止抗原抗体反应,除去标本中与反应无关的成分、游离的酶标物以及反应过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。可用洗板机洗板或手工洗板,前者洗涤质量较好,各反应孔洗涤效果均一,批内、批间差异小,手工洗板应注意控制各孔洗涤效果,差异不宜太大。

5.准确判定结果须使用ELISA测读仪(酶标仪),比色法判读可选择单波长或双波长,根据反应液颜色的不同选用不同波长的滤光片,以空白孔校零测定反应孔的吸光度值(A值)。酶标仪具有良好的重复性。

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