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产品规格
可售数量: 200slides
AF488 酪胺(XFD488 tyramide) 货号11070应用范围
该产品适合标记抗体或蛋白,也可应用于细胞或组织。
AF488 酪胺(XFD488 tyramide) 货号11070优势
1.增强荧光信号;
2.提高检测灵敏度。
AF488 酪胺(XFD488 tyramide) 货号11070适用仪器
荧光显微镜
Ex: | FITC滤波片组 |
Em: | FITC滤波片组 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
滤波片: | FITC滤波片组 |
AF488 酪胺(XFD488 tyramide) 货号11070概述
AF488酪胺(XFD488 tyramide reagent),是一种用于荧光信号放大的产品,它通过HRP和过氧化氢催化,标记到抗体上。
图为AF488 酪胺(XFD488 tyramide)化学结构图
AF488 酪胺(XFD488 tyramide) 货号11070参数
Ex(nm) | 499 |
Em(nm) | 520 |
分子量 | 856.02 |
溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在-15℃以下保存,避光防潮 |
外观 | 固体 |
保质期 | 12个月 |
规格 | 200 Slides |
AF488 酪胺(XFD488 tyramide) 货号11070注意事项
1. 该产品不能进行活体成像。
2. 100slides:一管试剂足够100个玻片使用。
3. 200slides大约为100ug。
AF488 酪胺(XFD488 tyramide) 货号11070染色样品示例
概述
1.固定/透化/阻断细胞或组织
2.在封闭缓冲液中加入一抗
3.加入HRP偶联的二抗
4.准备酪胺工作溶液,室温下在细胞或组织中5-10分钟
操作步骤
在没有额外说明的情况下,所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.Tyramide原液(200X):
将100μLDMSO加入小瓶中并充分混合。
注意:未使用的Tyramide原液可以在2-8℃下储存。
2.Tyramide工作溶液(1X):
将100μLTyramide原液加入20 mL含有0.003%H2O2的缓冲液中。
注意:Tris Buffer,pH = 7.4可用于获得性能。
注意:Tyramide工作溶液应立即使用。
注意:20 mL溶液适用于200次测试。
3.细胞固定和透化
3.1在室温下用PBS中的3.7%甲醛固定细胞或组织20分钟。
3.2用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.3在室温下用0.1%Triton X-100溶液使细胞透化1-5分钟。
3.4用PBS冲洗细胞或组织两次。
4.过氧化物酶标记
4.1任选:通过在过氧化物酶猝灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性。 在室温下用PBS冲洗两次。
4.2可选:如果使用HRP偶联的链霉抗生物素蛋白,建议通过生物素阻断缓冲液阻断内源性生物素。
4.3用优选的封闭溶液(例如含有1%BSA的PBS)在4℃下封闭30分钟。
4.4取出封闭溶液,加入在推荐抗体稀释液中稀释的一抗在室温下60分钟或在4°C下过夜。
4.5用PBS洗涤三次,每次5分钟。
4.6向每个样品中加入100μL二抗-HRP工作溶液,在室温下孵育60分钟。
注意孵育时间和浓度可根据信号强度而变化。
4.7用PBS洗涤三次,每次5分钟。
5.Tyramide标记
5.1为每个样品准备并应用100μLTyramide工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。
注意:如果您观察到非特异性信号,可以缩短Tyramide的孵育时间。 您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育期。 或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Tyramide。
5.2用PBS冲洗三次。
6.荧光成像
6.1根据需要对细胞或组织样本进行计数。 AAT提供了一系列细胞核复染试剂,如表1所列。按照试剂提供的说明进行操作。
6.2使用具有抗褪色特性的安装介质安装盖玻片。
6.3使用适当的过滤器组可视化来自Tyramide标签的信号。
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18502920169
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029-68064558
AF488 酪胺 货号11070
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