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Buccutite MTA-Dye 650
产品订购:QQ:1485814040
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简要概述
Buccutite MTA-Dye 650是美国AAT Bioquest生产的交联剂,我们的Buccutite 交联技术提供了 方便, 有效的交联方法,它以高共轭产率连接两种生物分子。我们的方法使用一对交联剂:Buccutite MTA和Buccutite FOL。MTA被添加到一个分子中,而FOL被添加到另一分子。交联反应是通过将Molecule-1-Buccutite MTA和Molecule-2-Buccutite FOL混合而引发的。该交联反应性能测试结果非常理想,它在极其温和和中性的条件下发生,不需要任何催化剂。该Buccutite MTA试剂用于确定Molecule-1-Buccutite MTA的MTA基团数量。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Buccutite MTA-Dye 650。
产品说明书
样品实验方案
溶液配制
储备溶液配制
Buccutite MTA-Dye 650储备溶液(10 mM):将200 uL DMSO添加到Buccutite MTA-Dye 650小瓶中以制备10 mM储备溶液。注意:Buccutite MTA-Dye 650储备溶液应在制备后储存在-20°C下,如果避免反复的冻融循环,则应稳定保存2个月。
实验步骤
MTA样品制备
使用100 ug MTA修饰的样品(例如:用MTA组修饰的抗体或其他蛋白质,分子量应高于15,000)。
用PBS将体积调节至100 uL。
运行MTA分析
将10 uL 10 mM Buccutite MTA-Dye 650储备溶液添加到MTA样品溶液中。
将反应混合物保持在室温下,旋转或摇动60分钟。
准备离心柱(Cat#60500)进行样品纯化。
用干净的收集管将反应混合物上样至离心柱。将所有溶液加载到色谱柱后,在顶部添加10 uL PBS,然后以1,000 x g的速度离心色谱柱5分钟。
用收集管收集溶液。
用0.5 mL石英比色皿或Nanodrop测量吸收光谱。 注意:用PBS将洗脱液稀释5-10倍,测量800 nm至250 nm的吸收光谱,或仅读取280 nm和654 nm处的吸光度值。
使用以下公式计算MTA#(MTA摩尔数/分子摩尔数)。MTA#=(A654 / 250000)/ {(A280-0.09 X A654)/ EC}
A280:在280 nm处洗脱液的吸光度
A654:在654 nm处洗脱液的吸光度
EC:样品的消光系数(M -1 cm -1)
数据分析
MTA计算:
样品: GxM IgG-MTA,100μLPBS中的100 ug
用Nanodrop分光光度计测量吸光度:
A280 nm = 0.922,A654 nm = 2.270,CF280 = 0.09,654 nm时的
EC(Buccutite MTA-Dye 650)= 250,000 M -1 cm -1
280 nm IgG的IgG EC = 210,000 M -1 cm -1
MTA# (每摩尔IgG的MTA摩尔数)=(2.270 / 250000)/ {(0.922-0.09 X 2.270)/ 210000} = 2.6
图示
图1. Buccutite 交联技术提供了 方便, 有效的交联方法,以高共轭产率连接两个生物分子。我们的方法使用一对交联剂:Buccutite MTA和Buccutite FOL。MTA被添加到一个分子,而FOL被添加到另一分子。交联反应是通过将Molecule-1-Buccutite MTA和Molecule-2-Buccutite FOL混合而引发的。该交联反应在极其温和和中性的条件下发生,不需要任何催化剂。 |
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18502920169
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029-68064558
Buccutite MTA-Dye 650 货号5370
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