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AAT Bioquest Amplite 硫醇定量试剂盒(荧光法)绿色荧光 货号5524

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200Tests起订

产品规格

可售数量： 200Tests

西安百萤生物科技有限公司

9年

经营年限

陕西西安

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9.5

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产品属性

Amplite 硫醇定量试剂盒(荧光法)绿色荧光


适用范围

用于硫醇定量

 

产品介绍

游离硫醇（包括游离半胱氨酸、谷胱甘肽及蛋白质中的半胱氨酸残基）的检测与定量是研究多种生物系统中生理过程和事件的关键任务。监测生物样本中还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽的水平，对于评估细胞和组织的氧化还原状态及解毒功能至关重要，这直接关系到谷胱甘肽在抵抗氧化应激和自由基介导的细胞损伤中的保护作用。半胱氨酸代谢异常会导致多种疾病，包括：胱氨酸贮积症和胱氨酸尿症。目前市场上可用于生物体系硫醇定量的试剂或检测盒数量有限，且普遍存在灵敏度不足、操作流程繁琐复杂问题

我们的 Amplite® 荧光总硫醇定量试剂盒提供了一种超灵敏的荧光测定方法，可用于定量存在于小分子中的硫醇。该试剂盒采用专有的非荧光染料，与硫醇反应后会发出强荧光。提供超灵敏的荧光检测方案：1）可检测低至1皮摩尔的半胱氨酸或GSH（100μL体系中检测限达10nM）；2）一步法荧光检测，流程简单 ；3）支持96孔板或384孔板检测格式，易于实现自动化操作

针对蛋白质硫醇基团的快速定量，我们特别推荐使用经过优化的专用试剂盒（货号#5529），该产品针对蛋白样品进行了专门优化，能够提供更准确的检测结果

注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！




产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备GSH工作溶液（50μL）
2.添加GSH标准品或测试样品（50μL）
3.在室温下孵育10至60分钟
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光增加（截止= 515 nm）


溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 GSH标准溶液（1 mM）：
将200μLddH2 O加入到GSH标准品（组分C）的小瓶中以制备1mM（1nmol /μL）GSH标准溶液。

1.2 Thiolite Green原液（100X）：
将100μLDMSO（组分D）加入到Thiolite Green（组分A）的小瓶中以制备100X Thiolite Green原液。


2.标准溶液配制
将30μL的1mM（1nmol /μL）GSH标准溶液加入到970μL的测定缓冲液（组分B）中以产生30μM（30pmol /μL）GSH标准溶液。 取30μM（30 pmol /μL）GSH标准溶液，进行1：3连续稀释，得到用分析缓冲液（组分B）连续稀释的GSH标准品（SD7-SD1）。 注意：稀释的GSH标准溶液不稳定。 在4小时内使用。


3.工作溶液配制

将50μL100XThiolite Green原液加入5 mL分析缓冲液（组分B）中，充分混合，制成GSH工作溶液。 注意：这种GSH工作溶液足以容纳一个96孔板。 在室温下不稳定，应在2小时内及时使用。 避免暴露在光线   注意：或者，可以通过按比例添加含有分析缓冲液（组分B）的100X Thiolite Green原液来制备GSH工作溶液。


操作步骤

表1.实心黑色96孔微孔板中GSH标准品和测试样品的布局。 SD = GSH标准品（SD1  -  SD7,0.014至10μM）; BL =空白对照; TS =测试样品

BLBLTSTS
SD1SD1......
SD2SD2......
SD3SD3......
SD4SD4......
SD5SD5......
SD6SD6......
SD7SD7......


表2.每个孔的试剂组成

孔容积试剂
SD1-SD750ul连续稀释液（0.014至10μM）
BL50ul分析缓冲液
TS50ul测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备GSH标准品（SD），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。 注意：根据需要处理细胞或组织样本。

2.向GSH标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLGSH工作溶液，使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLGSH工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10至60分钟，避光。

4.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）下监测荧光增加。

级别 超纯、高纯
含量 95%
产品规格 200 Tests
品牌 AAT Bioquest
用途范围 AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 免费技术咨询 顺丰包邮

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