Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒

简要概述

Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于荧光素酶报告基因的试剂盒，β-半乳糖苷酶，β-葡萄糖醛酸酶和荧光素酶是常见的报告基因，而这其中，萤火虫荧光素酶是功能多的报告基因。近，其它荧光素酶的使用在逐渐稳固的上升，例如来源于海洋桡脚类的动物高斯基质衍而来的生物发光酶，即高斯荧光素酶。由于高斯荧光素酶受体分子非常小，因此不需要ATP的辅助。高斯荧光素酶是一种分子量为20kDa的蛋白质，在氧分子存在条件下，催化腔肠素氧化形成荧光。Amplite 高斯荧光素酶报告基团检测试剂盒使用独特的发光基质对细胞培养基中荧光素酶活性进行定量检测。我们所提供的发光产品与高斯荧光素酶反应时，发射强光。本试剂盒提供所有必需组分，并且适用于HTS（高通量筛选）研究。本试剂盒灵敏度高，可以便捷地用于96或384微孔板分析。本检测法适合标准的细胞生长培养基。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备样品（50 µL）
2.加入50 µL高斯荧光素酶工作溶液
3.在室温下孵育10-15分钟
4.监控发光强度

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1.1高斯荧光素酶原液（100X）：
将50 µL（对于Cat＃12530），0.5 mL（对于Cat＃12531）或2.5 mL（对于Cat＃12532）反应缓冲液（组分B）转移到1小瓶荧光素酶底物（组分A）中，并充分混合。

2.工作溶液

使用1：100稀释因子和测定缓冲液（组分C）稀释100X高斯萤光素荧光素酶测定储备液，以制备高斯萤光素荧光素酶工作溶液。注意：重新配制的高斯荧光素酶工作溶液对光非常敏感。它不稳定，应准备新鲜，放在冰上，并在2小时内使用。

点击查看细胞制备指南

样品操作及分析

1.通过在所需化合物缓冲液中加入10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）来用测试化合物处理细胞（或样品）。对于空白孔（没有细胞的培养基），添加相应量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37°C，5％CO₂培养箱中孵育所需的时间，通常为4小时至过夜。

3.运行高斯荧光素酶测定：将连续稀释的高斯荧光素酶或培养上清液的50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板移液到微量滴定板中，然后与50 µL /孔/ 96-孔混合。孔板或高斯荧光素酶工作溶液的12.5 µL /孔/ 384孔板。

4.在避光的条件下，在室温下孵育平板10至15分钟。

5.用发光计读取发光强度。

级别超纯、高纯

含量 95%

产品规格 10 plate