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产品介绍
Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒专为通过检测磷脂酰丝氨酸(PS)外翻现象来监测细胞凋亡而设计。在细胞凋亡过程中,磷脂酰丝氨酸会从细胞膜内侧翻转至外侧。细胞表面出现磷脂酰丝氨酸是凋亡早期/中期的普遍标志,这一现象可在细胞形态学变化显现前被检测到。
Cell Meter FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒采用可特异性结合磷脂酰丝氨酸(PS)的FITC标记膜联蛋白V(FITC-Annexin V)荧光偶联物。经实验验证,该FITC-Annexin V偶联物能选择性结合PS。本检测体系经过优化,适用于配备488 nm激发激光和530/30 nm发射滤光片(FITC通道)的流式细胞仪进行细胞凋亡监测。
实验操作流程
1.使用测试化合物处理细胞诱导凋亡(如:Jurkat细胞用星形孢菌素处理4-6小时)
注意: 由于在细胞脱离或收获过程中可能会发生特定的膜损伤,因此不常对贴壁细胞进行 Annexin V 流式细胞术分析。然而,Casiola-Rosen 等人和 van Engelend 等人之前已经报道了在贴壁细胞类型上使用 Annexin V 进行流式细胞术的方法。
2.离心收集细胞(1-5×10⁵细胞/管)
3.用200 µL检测缓冲液(组分B)重悬
4.加入2 µL的 100X FITC-Annexin V储备液
可选: 对于坏死细胞,添加2 µL的100X 碘化丙啶(组分C)。
5.室温避光孵育20-60分钟
可选:加入300 µL检测缓冲液(组分B)以增加样本体积。
6.使用FL1通道(Ex/Em = 490/525 nm)的流式细胞仪监测FITC-Annexin V的荧光强度;当向细胞中加入碘化丙啶时,使用FL2通道测量细胞活力。
注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床及其他非科研用途!
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18502920169
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029-68064558
AAT Bioquest FITC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22839
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