Cell Meter 荧光法细胞内pH检测试剂盒

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产品介绍

细胞内pH值的变化与多种生理和病理过程密切相关，包括细胞增殖、凋亡、受精、恶性肿瘤、离子转运、溶酶体贮积症以及阿尔茨海默病等。Cell Meter™荧光法细胞内pH检测试剂盒采用AAT Bioquest公司独家研发的荧光指示剂，可精准测量细胞内pH值的相对变化。该试剂盒采用均质、动态的活细胞荧光检测法，提供标准操作流程和酸负载流程两种检测方案。

而"酸负载"流程则专门用于监测由GPCR激活或生长因子活性引起的细胞代谢变化所导致的细胞内pH值升高。在"酸负载"流程中，待荧光pH染料加载至细胞后，立即以最小体积加入氯化铵溶液进行"酸负载"处理，随后以较大体积缓冲液（约4倍）加入激动剂。溶液体积的骤变会引发细胞内的氨（NH3）迅速外流，导致细胞内pH值急剧下降，荧光信号随之减弱。通过监测荧光信号的相对增强程度，即可量化评估激动剂对细胞内pH值恢复的调控作用。

适用仪器

荧光酶标仪
Ex:	490 nm
Em：	535 nm
Cutoff：	515 nm
推荐孔板:	黑色透明底板

注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床及其他非科研用途！

示例数据分析和数据

从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算Carbachol样品。

图1. CHO-M1细胞中的卡巴胆碱剂量反应。在96孔黑壁/透明底板中，将CHO-M1细胞以每100μL/孔60,000个细胞接种过夜。将生长培养基用50μL/孔的RatioWorks BCFL，AM染料加载溶液替换37℃1小时，然后用5μL/孔的220mM NH 4 Cl孵育15分钟。通过FlexStation（Molecular Devices）添加Carbachol（200μL/孔）以达到指示的浓度。使用Ex / Em = 490 / 535nm（截止= 515nm）产生荧光信号。

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