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ReadiUse Bio-Gel P-6离心柱
简要概述
ReadiUse Spin色谱柱,用于缓冲液交换和脱盐应用。将材料应用于旋转柱时,小于色谱柱排除极限(MW〜6000)的物质将保留在色谱柱中,大分子(如蛋白质)(MW大于15,000)将被缓冲液洗脱。样品体积为30uL至100uL。它们与带有2.0 ml微量离心管或12 x 75试管的旋转桶式离心机兼容。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的ReadiUse Bio-Gel P-6色谱柱。
产品说明书
操作步骤
多次旋转离心柱,使沉降的凝胶悬浮并去除气泡。
摘下 部分盖子,然后将色谱柱放入微量离心管(2 mL)中。取下上端盖子,使多余的填料缓冲液在重力作用下排出,直至到达管内凝胶顶部。如果色谱柱没有开始流动,则将盖子推回色谱柱,然后再次将其取下以开始流动。去掉耗尽的缓冲液,然后将色谱柱放回试管中。
在1,000 xg的旋转桶式离心机中离心1分钟,以除去缓冲液。
将1 mL平衡缓冲液加到色谱柱上。通过重力使缓冲液流失或将色谱柱离心1分钟以除去缓冲液。从收集管中丢弃缓冲液。重复此过程3-4次。
在1,000 xg的旋转桶式离心机中离心2分钟,以除去反应缓冲液。
将色谱柱放在干净的2.0 ml微量离心管或12 x 75 mm试管中。小心地将样品(20–100 µl)加入色谱柱的顶部中心。可能需要仔细调整样品量以达到性能。
上样后,以1,000 x g离心色谱柱5分钟。
离心后,纯化的样品现在位于平衡缓冲液中,并且将保留小于色谱柱排除极限(〜6000)的分子于色谱柱中。
收集洗脱液,并正确处理用过的色谱柱。注意:旋转柱可放入2 mL微量离心管或12 x 75 mm试管中,以在离心过程中收集样品。使用色谱柱随附的2 mL微管进行初始色谱柱平衡步骤。注意:摆动桶式离心机能够产生至少1,000 xg的力,适用于Bio-Spin色谱柱。在特定转速下产生的重力是微量离心机转子半径的函数。有关从每分钟转数(RPM)转换为离心力的信息,请参阅离心机说明书。或者,使用以下所示的公式来计算达到1000 x g引力所需的RPM速度。
CF(g)=(1.12 X 10 -5)X(RPM)2 X r
RCF =相对离心力,
RPM =转子速度
r =从转子中心到Bio-Spin色谱柱中间的半径(cm)
图示
图1. 预装的ReadiUse Bio-Gel P6离心柱。 该柱用PBS缓冲液中的P-6 DG填充,样品体积为50〜100 uL。分子量极限约为6000,大分子(如蛋白质)(分子量> 15,000)将用缓冲液洗脱。
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18502920169
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029-68064558
AAT Bioquest ReadiUse Bio-Gel P-6离心柱 货号60500
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