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12通道自动化固相萃取仪 CYCQ-12B spe固相萃取装置
固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE)技术,发展于上世纪70年代,由于其具有可靠、消耗试剂少等优点,在许多领域取代了传统的液-液萃取而成为样品前处理的有效手段。
一些传统的介绍SPE的书籍将其归于一个液相色谱的原理,这其实是引起使用不当的主要源由之一。把SPE小柱看作一根液相色谱柱,不如把它看成单纯的萃取剂更合适,因为:液相色谱的重点在于分离,而SPE的重点在于萃取。固相萃取技术在样品处理中的作用分两种:一是净化,二是富集,这两种作用可能同时存在。
固体萃取和液-液萃取相比,其长处在于方便和消耗试剂少,短处在于批次间的重复性难以保证。出现这种情况的原因在于:液体试剂的重复性好,只要其纯度可靠,不同年代的产品的物理化学性质都是可靠的。而固体萃取剂就算保证了纯度外,还存在着颗粒度的差异,外形的差异等液体试剂不存在的且难以衡量的因素,不同年代不同批号的萃取性质可能会有较大的区别。
从理论上和厂家宣传来看,固相萃取应该在色谱分析的前处理上得到很好的应用:有机溶剂用得很少,可批量处理样品,既可富集,又能除杂质,给人印象是前处理的革命性进步。然而现实情况,起码在国内,虽然推广了多年,实际应用还是相当有限。
SPE应用得不广,与我们的使用方式和期望有关,也与它本身的局限有关。对于供应商来说,从经济利益出发,向来都是忽略固相萃取的局限与不足。固相萃取可以作为前处理手段的一个很好补充,但是在使用时,yi定要清醒知道到它的优点和缺点,注意因地制宜,扬长避短。
在保留化合物模式下净化样品时,通常会经历上样、淋洗和洗脱三个步骤。淋洗和洗脱溶剂选择的不合适也会使得净化效果不理想。
例如淋洗液洗脱强度太弱,淋洗时不能将杂质淋洗掉,或者洗脱液的强度太强,洗脱时将杂质一并洗脱下来,这两种情况均会导致净化效果不理想。
由此可见,采用固相萃取柱净化样品时,填料、淋洗液和洗脱液的选择尤为重要。当遇到一些复杂样品,一种填料不能满足净化效果时,可以选择串联固相萃取柱或者采用混合填料的方式进行操作。
5、流速缓慢
固相萃取过程中流速不能太快,流速太快不利于目标化合物在填料上的保留以及溶剂与目标化合物或者填料的相互作用,从而影响保留或者洗脱过程。当然流速也不能太慢,否则会大大延长前处理的时间。
固相萃取装置固相萃取过程中导致流速缓慢的原因有:
(1)样品粘度高,例如食品中遇到浓缩汁、糖果时,需要对样品充分稀释,降低上样液的浓度;
(2)填料较多或者太紧密,此时需要增强负压或者减少填料的使用量;
(3)溶剂性不匹配,例如SN/T1924-2011中淋洗固相萃取柱时,先用水,接着两者的性不同,从而导致流速很慢,遇到这种情况,可以增加负压或者选用合适的溶剂进行过渡。
6.如何建立固相萃取方法
6.1固相萃取基本步骤
固相萃取的步骤视萃取机理及检测手段可多可少。对于反相固相萃取柱而言,其基本步骤有五步:
- 固相萃取柱预处理
- 样品添加
- 固相萃取柱洗涤
- 固相萃取柱干燥
- 目标物洗脱
固相萃取柱预处理
无论是自行装填的还是商品化的固相萃取柱在使用之前都是以干燥的状态存在的。如同新购置的HPLC柱一样,在使用时都先对柱子进行活化、平衡。对于反相固相萃取柱而言,进行柱子预处理的主要目的有两个:
对固相柱进行活化,展开碳氢链增加和分析物作用的表面积。
对固相柱进行清洗,除去柱上吸附的对分析有影响的杂质。
在具体操作上,一般程序是:先有机溶剂淋洗柱子,然后再用水或缓冲溶剂除去多余的有机溶剂。因为上述有机溶剂都是良好的洗脱剂,过多的存在会使目标化合物在吸附过程中损失。当用离子交换 SPE 时, 注意系统的pH。其pH值应该与样品保持一致。如果使用的是手工的操作方法,注意在加样于固相柱前已处理好的固相萃取柱必需保持湿润。 这点对于非高聚物的固相萃取柱尤为重要。否则会出现回收率低、重现性差的结果。
12通道自动化固相萃取仪 CYCQ-12B spe固相萃取装置
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